科研中的miRNA研究方法總結microRNA(miRNA)是一類長度在22nt左右的內源非編碼小RNA，廣泛存在于動物、植物、病毒等多種有機體中。1993年，Lee等人在秀麗新小桿線蟲(C.elegans)中發現了控制著線蟲時序性發育的lin-4。2000年，Reinhart等發現了另一個具有轉錄后調節功能的小分子RNA：let-7。隨后的幾年時間里，許多研究人員相繼發現了這類RNA，并將這些具有時空表達特異性的非編碼小分子RNA命名為microRNA(miRNA)。從長的...

近年來隨著生物技術的不斷發展，出現了許多克隆新基因的方法和手段，如圖譜克隆技術、轉座子標簽技術、mRNA差異顯示技術二基因組減法技術以及cDNA文庫篩選技術等。但上述方法人多具有實驗周期長、技術步驟煩瑣且工作量大等特點。cDNA末端快速擴增技術（rapidamplificationofcDNAends，RACE）是一種基于PCR從低豐度的轉錄本中快速擴增cDNA的5'和3'末端的有效方法，以其簡單、快速、廉價等優勢而受到越來越多的重視.經典的RACE技術是由Frohman等（...

每當拿到一個質粒圖譜，是不是一下就有點懵了？這些ori、RBS、tet是什么？這些箭頭代表什么，轉錄的方向嗎？不要著急，申知心生物把這些告訴你，也許會解決你的困惑。質粒和載體傻傻分不清楚質粒(Plasmid)是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區DNA原有的能夠自主復制的較小的DNA分子(即細胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的質粒雖然都是環狀構型。載體即要把一個有用的基因（目的基因——研究或應用基因）通過基因工程手段送到生物細胞（受體細胞），需要運載工具（交通工具）攜帶外源基因進...

RTPrimer的佳選擇通常RTprimer可分為三類：oligodT，隨機引物以及基因特異性引物。OligodT引物之所以應用范圍更加廣泛，是因為可由此獲得mRNA的全長拷貝。然而如果mRNA長度過長4kb，或者沒有polyA尾（原核mRNA或rRNA），就需要考慮使用隨機引物進行RNA的反轉錄。隨機引物雖能長基因的5’末端的轉錄，但并不能獲得整個基因全長的cDNAs，且對RNA樣品質量要求比較高，此時可用6-8個核酸聚合體來提高cDNAs的合成量。而對于真核生物的qPCR...

對于Elisa試劑盒的使用，總有解不完的疑問，比如說加樣器不確；特別10ul以下的加樣器，對成果影響；保溫設備不良；洗刷用水不規范。如何解決這些疑問呢：1、加樣不；沒有混勻。加樣時必定要細心。加樣后，再查看，以防漏加、錯加。2、加樣后，重復抽吸3次混勻，防止血清集合孔底，致使非特異性吸附。洗刷洗刷不①每次灌水洗刷，應停止30秒鐘；②選用吸水紙作為襯墊，每次洗刷后扣干孔內水分；3、可選用塑料洗刷瓶。加酶反響漏加滴加后，細心查看各孔成果判別①包含陰性對照孔在內，各孔顯色普遍偏深；...

臨淵羨魚階組里的前輩們看起來個個都是牛人，各有各的事業，可是喂~誰來提挈小生則個！導師：“在咱們這個組的大框架下自己找個坑填上去~”——坑在哪？師姐：“問我問題之前不能先自己查一下嘛？你這個問題明明有現成答案呀~”——上哪查師兄：“去去去，小孩子一邊看文獻去！”——看不懂~_看什么文獻，怎么看？專業術語不懂怎么辦？好吧，大不了啃字典，先把組里發過的文章都過一遍好了。終于有一天組會討論時，哇我居然聽懂了躍躍欲試階已經能相當熟練地在知網、NCBI等數據庫上查到自己想要的信息了，儀...

雖然說內科和外科都是相親相愛的一家人，但是細數一下，兩者之間還是有一些有趣的差別，看看網友們是如何總結的。區別一：內科大夫多話癆皇上：此番遼國起傾國之力，那蕭皇后親率三十萬大軍南下，諸位愛卿如何是好？內科大臣:啟稟皇上，臣以為還當細細打探方能定奪，不宜早下決定。究竟是蕭皇后親征，還是南院大王統帥？又或者是其他將領？這分型應當明確。三十萬兵力應當有所鑒別，據臣所知遼國連續三年大旱，北方更有金人犯境，能聚三十萬兵力實在存疑，打個問號。遼國大軍南下，是分兵幾路？每路兵馬幾何？還需完...

一、WesternBlot實驗為什么要用內參?WesternBlot實驗結果進行內參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達量的相對多少，前提條件是等量的組織細胞蛋白上樣，才有比較的基礎，特別是表達量不高時，上樣量的的差別就很有可能影響結果的分析。因此，在WesternBlot試驗中，進行內參的檢測，有以下兩點作用：1、校正蛋白質定量、上樣過程中存在的誤差，實驗結果的準確性；2、使用內參可以作為空白對照，檢測蛋白轉膜情況是否、整個WesternBlot顯色發光體系是否正常。二、你的內...