小鼠鼻炎模型構(gòu)建

一、模型分類與構(gòu)建策略

1. 過敏性鼻炎模型

核心機(jī)制：Th2型免疫應(yīng)答主導(dǎo)，涉及IgE介導(dǎo)的速發(fā)型過敏反應(yīng)
方法：

• 經(jīng)典OVA致敏法（占文獻(xiàn)案例70%）：

• 動(dòng)物品系：BALB/c（Th2敏感）、C57BL/6（Th1/Th17偏倚）

• 致敏階段：腹腔注射卵清蛋白（OVA，100μg）聯(lián)合氫氧化鋁佐劑（4mg），每周1次×3周

• 激發(fā)階段：OVA（1mg/mL）鼻腔滴注×7天，誘導(dǎo)噴嚏、流涕等典型癥狀

• 優(yōu)化方案：添加SEB（金黃色葡萄球菌腸毒素B）增強(qiáng)Th2極化，IL-5/IL-13表達(dá)量提升3倍

創(chuàng)新模型：

• 基因工程模型：STAT6轉(zhuǎn)基因小鼠自發(fā)Th2炎癥，避免人工致敏干擾

• 多信號(hào)通路研究：MAPK/PI3K-AKT/NF-κB通路激活可視化（如熒光報(bào)告基因小鼠）

2. 慢性鼻竇炎伴鼻息肉模型

分型構(gòu)建：

特殊模型：

• 真菌誘導(dǎo)模型：煙曲霉菌滴鼻誘導(dǎo)IL-33釋放，模擬頑固性鼻竇炎

• 缺氧模型：HIF-1α過表達(dá)促進(jìn)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT），加速息肉形成

3. 轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)模型

• 人源化模型：移植CRSwNP患者PBMC至免疫缺陷小鼠，保留90%供體免疫特征

• 類器官芯片：鼻上皮類器官與成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)，模擬黏膜屏障動(dòng)態(tài)損傷

二、關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)與優(yōu)化

1. 品系選擇指南

2. 時(shí)間-劑量關(guān)鍵窗口

• 急性模型：3周（OVA致敏+激發(fā)）

• 慢性模型：8-12周（SEB/LPS反復(fù)刺激）

• 加速模型：MC903誘導(dǎo)19天形成息肉

3. 多模態(tài)刺激策略

• 物理-化學(xué)復(fù)合：鼻腔滴注LPS聯(lián)合冷應(yīng)激（4℃環(huán)境暴露）

• 代謝干預(yù)：高脂飲食（60%脂肪）增強(qiáng)炎癥持續(xù)性

三、模型驗(yàn)證體系

1. 行為學(xué)評(píng)估

• 癥狀評(píng)分：

• 噴嚏次數(shù)（>15次/10min為陽性）

• 鼻部搔抓頻率（紅外監(jiān)測系統(tǒng)量化）

• 嗅覺測試：食物埋藏實(shí)驗(yàn)潛伏期延長>50%

2. 組織病理學(xué)

3. 分子生物學(xué)檢測

• 炎癥因子譜：

• Th2型：IL-4 (>80pg/mL)、IL-5 (>120pg/mL)、IL-13 (>60pg/mL)

• Th17型：IL-17A (>50pg/mL)、CCL20 (>200pg/mL)

• 血清標(biāo)志物：總IgE (>1000ng/mL)、ECP（嗜酸細(xì)胞陽離子蛋白）

4. 功能影像學(xué)

• 微型CT：量化鼻竇腔容積縮小（>20%為陽性）

• 光聲成像：實(shí)時(shí)監(jiān)測血管密度變化（分辨率10μm）

四、模型局限性及優(yōu)化方向

1. 現(xiàn)存問題

• 時(shí)間成本高：經(jīng)典CRS模型需12周，阻礙藥物高通量篩選

• 物種差異：小鼠鼻竇解剖簡單，缺乏人類篩竇結(jié)構(gòu)

• 異質(zhì)性模擬不足：難以復(fù)刻人類CRS內(nèi)型多樣性

2. 技術(shù)創(chuàng)新

• 可逆誘導(dǎo)系統(tǒng)：光控CRISPR激活/抑制技術(shù)實(shí)現(xiàn)炎癥動(dòng)態(tài)調(diào)控

• 器官芯片：3D打印鼻竇微流體裝置，集成機(jī)械應(yīng)力刺激

• 多組學(xué)驗(yàn)證：單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組+空間代謝組解析區(qū)域免疫微環(huán)境

3. 標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)

• 國際共識(shí)指標(biāo)：制定CRS模型嚴(yán)重度指數(shù)（CMSI），含6項(xiàng)核心參數(shù)

• 倫理優(yōu)化：植入式生物傳感器替代重復(fù)解剖，減少動(dòng)物使用量80%

五、典型應(yīng)用案例

1. 藥物研發(fā)

• 度普利尤單抗：在IL-4Rα人源化小鼠中降低IL-13水平75%

• 中藥復(fù)方：補(bǔ)肺健脾方通過抑制NLRP3炎癥小體，改善黏膜纖毛清除率

2. 機(jī)制解析

• HIF-1α靶點(diǎn)：抑制劑PX-478使息肉體積縮小60%

• 腸道-鼻軸：糞菌移植恢復(fù)SCFAs水平，緩解Th2炎癥