上海細胞劃痕實驗.

                           上海細胞劃痕實驗.
細胞劃痕實驗是一種簡單易行的檢測細胞運動的方法，可以用來檢測貼壁生長腫瘤細胞的侵襲轉移能力。

上海細胞劃痕實驗.實驗內容：

材料：6孔板（其他的也可以，但感覺6孔比較好，大小適中），MARKER筆，直尺，20微升槍頭（滅菌），無血清培養基，PBS

步驟：能滅菌的器械都要滅菌。MARKER筆，直尺在操作前紫外照射30MIN（超凈臺內）

1.先用MARKER筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻地劃橫線，大約每隔0.5-1cm一道，橫穿過孔，每孔至少穿過5條線。

2. 在空中加入約5*105個細胞，具體數量因細胞不同而不同，掌握為過液能鋪滿

3. 第二天用槍頭比著直尺，盡量垂直于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜

4. 用PBS洗細胞3次，去除劃下的細胞，加入無血清培養基。

5.放入37度5%CO2培養箱，培養，按0. 6 .12 24小時取樣，拍照。

注意事項：

一般做劃痕實驗，一般都在無血清或者低血清狀態下培養的，否則細胞增殖就不能忽略

按照6孔板背后劃線的垂直方向劃痕，可以形成若干交叉點，作為固定的監測點，這就解決了前后觀察時位置不固定的問題。