ELISA試劑盒常見問題及簡單處理方法

　　目前ELISA試劑盒的使用不僅是在科研和醫療上，一般的家庭也會購買用于檢測一些日常疾病。并且由于國產ELISA試劑盒的特異性和靈敏性高不斷提高，在日后ELISA試劑盒會越來越普及的。不過對于普通的百姓來說，無論使用國產ELISA試劑盒還是進口ELISA試劑盒都會出現一些問題，那么在遇見這些問題的時候應該怎么解決呢?以下是一些比較常見的問題：

　　1、試劑的選擇：選擇優良試劑大家都是知道的，但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。

　　2、加樣中可能遇到的問題：在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候，會碰到血清血漿不好分離的情況，這個時候的解決辦法好是先放在常溫中1到2小時，然后在進行離心處理

　　3、洗板時容易造成誤差：因為洗板是人工洗的，所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的，這個時候帶有主觀色彩，所以好多清洗幾次，還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動

　　4、顯色問題：使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長，都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應的時候，要先查看顯色劑本身的情況

　　5、終止反應：在加終止劑的時候由于傾倒速度快，差生氣泡，造成假陽性結果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒可

　　6、讀板：讀板的時候先應該板的清潔干凈。

　　ELISA試劑盒應注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應。如在冰箱中保存過久，其中的可發生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。